TFIID 組分 TAF7 已被廣泛表征為轉(zhuǎn)錄所必需的,并且對(duì)細(xì)胞增殖和分化至關(guān)重要。 在這里,我們報(bào)告 TAF7 是一種以前未知的 RNA 伴侶,有助于調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)合成。 從機(jī)制上講,TAF7 與細(xì)胞核中的 RNA 結(jié)合并將它們傳遞到細(xì)胞質(zhì)多核糖體中。 廣泛的目標(biāo) RNA 種類(lèi),包括 HIV-1 反式激活反應(yīng)元件,通過(guò) 3' 非翻譯區(qū)域內(nèi)的共有 CUG 基序與 TAF7 結(jié)合。 輸出到細(xì)胞質(zhì)取決于 TAF7 核輸出信號(hào),并通過(guò)依賴(lài)輸出蛋白 1 的途徑發(fā)生。 值得注意的是,破壞 TAF7 的 RNA 結(jié)合或其從細(xì)胞核的輸出會(huì)導(dǎo)致目標(biāo)信使 RNA 保留在細(xì)胞核中,并降低 TAF7 目標(biāo) RNA 的蛋白質(zhì)產(chǎn)物水平。 因此,TAF7 是一種必不可少的轉(zhuǎn)錄因子,在調(diào)節(jié) RNA 翻譯中起著關(guān)鍵作用,從而可能將這些過(guò)程聯(lián)系起來(lái)。
真核細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄和翻譯都是受到嚴(yán)格監(jiān)管的過(guò)程,具有多個(gè)步驟,可確保適當(dāng)?shù)暮铣伤健? 這兩個(gè)過(guò)程需要協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)以維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。 雖然轉(zhuǎn)錄和翻譯之間的協(xié)調(diào)在原核生物中已經(jīng)很好地建立,但對(duì)真核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯的整合卻知之甚少。 在酵母中,RNA 聚合酶 II 異源二聚體 Rpb4/7 共轉(zhuǎn)錄結(jié)合其目標(biāo) RNA 并調(diào)節(jié)其細(xì)胞質(zhì)穩(wěn)定性。 據(jù)報(bào)道,剪接因子 SRSF1 可間接調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄、RNA 輸出和翻譯。核轉(zhuǎn)錄因子 p53 已被證明具有細(xì)胞質(zhì)功能,主要通過(guò)其與翻譯機(jī)器組件的相互作用來(lái)調(diào)節(jié)翻譯。 然而,迄今為止沒(méi)有證據(jù)表明這些多效性活動(dòng)的功能是直接協(xié)調(diào)轉(zhuǎn)錄和翻譯。 在這里,我們探索了轉(zhuǎn)錄因子 TATA 盒結(jié)合蛋白 (TBP) 相關(guān)因子 7 (TAF7) 提供這種協(xié)調(diào)的可能性。
轉(zhuǎn)錄因子 TAF7 在調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄的許多步驟中起著關(guān)鍵作用。 作為通用轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合物的組分,TFIID,TAF7與TAF1成分并抑制其乙酰轉(zhuǎn)移酶活性,其是用于轉(zhuǎn)錄起始(必需相互作用)。 一旦轉(zhuǎn)錄前啟動(dòng)復(fù)合體組裝完成,TAF7 就會(huì)從 TAF1 中釋放出來(lái),從而啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。
TAF7 還結(jié)合并抑制涉及起始、暫停釋放和延伸的每個(gè)聚合酶 II (Pol II) C 端重復(fù)結(jié)構(gòu)域 (CTD) 激酶的激酶活性,即
TFIIH、含溴結(jié)構(gòu)域 4 (BRD4) 和分別為正轉(zhuǎn)錄延伸因子 b (P-TEFb)。 然后它與轉(zhuǎn)錄延伸機(jī)制一起進(jìn)入基因體。 因此,TAF7 作為一個(gè)關(guān)鍵的檢查點(diǎn)調(diào)節(jié)器,可以防止這些轉(zhuǎn)錄因子過(guò)早發(fā)揮作用,確保轉(zhuǎn)錄的每一步都在進(jìn)行下一步之前完成。
轉(zhuǎn)錄中對(duì) TAF7 的要求因細(xì)胞類(lèi)型而異。 一般來(lái)說(shuō),增殖細(xì)胞對(duì) TAF7 的需求比靜止的分化細(xì)胞要多。 人胚胎腎-293T 和小鼠胚胎細(xì)胞中 TAF7 的消耗抑制了調(diào)節(jié)增殖的基因的轉(zhuǎn)錄。 類(lèi)似地,在未成熟小鼠胸腺細(xì)胞中體內(nèi) TAF7 的缺失會(huì)抑制全局轉(zhuǎn)錄,導(dǎo)致其增殖和分化的終止。 相比之下,TAF7 缺失僅影響靜息外周 CD4 T 細(xì)胞中的少量轉(zhuǎn)錄本。
盡管大多數(shù)研究都集中在 TAF7 的轉(zhuǎn)錄功能上,但有一些證據(jù)表明 TAF7 的作用超出了轉(zhuǎn)錄調(diào)控。 TAF7 已顯示與 160-kDa 切割-聚腺苷酸化特異性因子亞基相關(guān)聯(lián),這是 mRNA 的 3' 聚腺苷酸化所必需的。 在 粟酒裂殖酵母中 ,人類(lèi) TAF7 的同源物 Ptr6p 的突變導(dǎo)致 RNA 在細(xì)胞核中的積累 。
考慮到我們之前的發(fā)現(xiàn),即 TAF7 在延伸過(guò)程中與 Pol II 和新生轉(zhuǎn)錄物一起傳播,我們假設(shè) TAF7 與 RNA 相關(guān)聯(lián)并執(zhí)行轉(zhuǎn)錄調(diào)控之外的功能。 我們現(xiàn)在發(fā)現(xiàn) TAF7 是一種 RNA 結(jié)合蛋白,可識(shí)別 3' 非翻譯區(qū) (3'UTR) 中的共有基序 CUG,并與大范圍的 RNA 種類(lèi)相關(guān)聯(lián)。 TAF7 將其目標(biāo) RNA 從細(xì)胞核連接到細(xì)胞質(zhì)中的多核糖體,在那里它有助于調(diào)節(jié)翻譯。 TAF7 與 RNA 結(jié)合的中斷或細(xì)胞質(zhì) TAF7 的耗盡導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的整體減少和其靶 RNA 的蛋白質(zhì)產(chǎn)物水平的特定降低。 我們提出了一個(gè)模型,其中轉(zhuǎn)錄和翻譯的調(diào)節(jié)通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子 TAF7 將目標(biāo) RNA 從細(xì)胞核傳遞到細(xì)胞質(zhì)多核糖體的機(jī)制聯(lián)系起來(lái),從而調(diào)節(jié)翻譯。
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