產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 價(jià)格 |
DNA pull down試劑盒(動(dòng)物) | FI8901 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 | |
DNA pull down試劑盒(植物) | FI8911 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 | |
DNA pull down試劑盒(微生物) | FI8921 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 |
DNA pull down是檢測DNA及其結(jié)合蛋白之間相互作用的主要實(shí)驗(yàn)手段之一,通常用來分析與目標(biāo)基因調(diào)控區(qū)域相結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子及其他調(diào)控蛋白。DNA pull-down試劑盒采用鏈霉親和素磁珠來高效調(diào)取生物素標(biāo)記的目標(biāo)DNA序列及其結(jié)合蛋白。首先針對目標(biāo)區(qū)域制備生物素化的 DNA 探針,之后利用鏈霉親和素磁珠捕獲目標(biāo)DNA探針,再與待測樣本核蛋白孵育,洗滌去除未結(jié)合的蛋白,即可得到“目標(biāo)DNA探針-蛋白質(zhì)”復(fù)合物,這種互作復(fù)合物既可以用Western blot檢測已知蛋白,也可以用質(zhì)譜(LC-MS/MS)鑒定未知蛋白。
DNA pull-down以感興趣的DNA序列為中心,尋找與該序列結(jié)合的蛋白質(zhì),最常見的應(yīng)用是尋找某特定基因啟動(dòng)子區(qū)域的轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄因子是一種DNA結(jié)合蛋白,它能夠與真核基因的順式作用元件(如啟動(dòng)子、增強(qiáng)子等)特異性結(jié)合來激活或抑制基因表達(dá)。以下列舉了可應(yīng)用DNA pulldown試劑盒的幾個(gè)研究方向:
1、特定基因的轉(zhuǎn)錄因子篩選研究
2、轉(zhuǎn)錄因子靶向結(jié)合特定基因的驗(yàn)證研究
3、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合定位或與其他蛋白質(zhì)相互作用
4、DNA修飾結(jié)合修飾酶、去修飾酶及讀取酶研究
DNA pull down試劑盒-輝駿生物產(chǎn)品優(yōu)勢
1、調(diào)取效率高:鏈霉親和素磁珠和生物素具有強(qiáng)大的親和力,且磁珠背景噪音低,特異性強(qiáng)。
2、裂解效率高:優(yōu)化的各裂解液配方分別適用于動(dòng)物、植物或微生物等樣本。
3、適配下游檢測:競爭洗脫效率高,蛋白無需變性,更有利于蛋白的質(zhì)譜檢測;
4、操作簡便,實(shí)驗(yàn)周期短,適合初學(xué)者。
試劑名稱 | 體積(12 Tests) | 體積(24 Tests) | 保存條件 |
鏈霉親和素磁珠 | 500 μL | 1 mL | 4 ℃ |
裂解緩沖液 | 7 mL | 14 mL | 4 ℃ |
NT2緩沖液 | 16 mL | 32 mL | 4 ℃ |
漂洗液 | 32 mL | 64 mL | 4 ℃ |
洗脫緩沖液 | 650 μL | 1.3 mL | -20 ℃ |
蛋白酶抑制劑 | 230 μL | 460 μL | -20 ℃ |
1. 提取細(xì)胞核蛋白;
2. 根據(jù)目標(biāo)DNA序列制備生物素標(biāo)記的探針;
3. 利用鏈霉親和素磁珠捕獲生物素化的DNA探針;
4. DNA探針與待測核蛋白液孵育,調(diào)取目標(biāo)DNA的結(jié)合蛋白。
DNA pull down預(yù)測結(jié)合蛋白的western-blot檢測圖
1. Ni P.Y. et al: YBX1-Mediated DNA Methylation-Dependent SHANK3 Expression in PBMCs and Developing Cortical Interneurons in Schizophrenia. 2023. Advanced Science. 1區(qū), IF=15.1.
2. Wang S.Q, et al: Chemotherapy-elicited extracellular vesicle CXCL1 from dying cells promotes triple-negative breast cancer metastasis by activating TAM/PD-L1 signaling. 2024. J Exp Clin Cancer Res. 1區(qū), IF=11.3.
3. Chen R. et al: Lnc-GD2H Promotes Proliferation by Forming a Feedback Loop With c-Myc and Enhances Differentiation Through Interacting With NACA to Upregulate Myog in C2C12 Myoblasts. 2021. Front Cell Dev Biol. 2區(qū), IF=6.684.
4. Tian H,J. et al: The transcription factor HMGB2 indirectly regulates APRIL expression and Gd-IgA1 production in patients with IgA nephropathy. 2024. Renal Failure. IF=3.
輝駿實(shí)力
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