產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 價(jià)格 |
生物素RNA pull down試劑盒(動(dòng)物) | FI8702 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 | |
生物素RNA pull down試劑盒(植物) | FI8712 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 | |
生物素RNA pull down試劑盒(微生物) | FI8722 | 12次/24次/40次 | 現(xiàn)貨 |
RNA pull-down是檢測(cè)RNA及其結(jié)合蛋白(RNA binding protein,RBP)之間相互作用的主要實(shí)驗(yàn)手段之一。生物素-RNA pull down試劑盒利用體外轉(zhuǎn)錄的生物素標(biāo)記RNA來模擬天然RNA分子,作為探針,與樣本裂解液孵育,探針與裂解液中的蛋白形成RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物;通過鏈霉親和素磁珠與生物素之間的強(qiáng)親和力,特異性捕獲生物素標(biāo)記的RNA,從而實(shí)現(xiàn)RNA結(jié)合蛋白(RBPs)的捕獲富集;之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)特定蛋白,也可以采用質(zhì)譜(LC-MS/MS)技術(shù)鑒定未知蛋白。
RNA結(jié)合蛋白(RBPs)是一類功能強(qiáng)大而廣泛的調(diào)節(jié)因子,約占細(xì)胞編碼的所有蛋白的5%-10%。除了少數(shù)RNA以核酶形式單獨(dú)發(fā)揮功能,大部分RNA通過與蛋白結(jié)合形成RNA-蛋白復(fù)合物來發(fā)揮作用。一方面,RBP參與RNA調(diào)控,另一方面,RNA也會(huì)調(diào)控RBPs。以下列舉了可應(yīng)用F2-RNA pull down試劑盒的幾個(gè)研究方向:
1. RNA活性、轉(zhuǎn)運(yùn)、定位調(diào)控;
2. RNA穩(wěn)定性、翻譯和降解;
3. RNA合成、可變剪切;
4. RNA修飾;
5. RBPs的活性、定位或與其他蛋白質(zhì)相互作用。
試劑名稱 | 體積(12 Tests) | 體積(24 Tests) | 保存條件 |
鏈霉親和素磁珠 | 500 μL | 1 mL | 4 ℃ |
裂解緩沖液 | 7 mL | 14 mL | 4 ℃ |
NT2緩沖液 | 16 mL | 32 mL | 4 ℃ |
RNA結(jié)構(gòu)緩沖液 | 650 μL | 1.3 mL | 4 ℃ |
漂洗液 | 32 mL | 64 mL | 4 ℃ |
洗脫緩沖液 | 650 μL | 1.3 mL | -20 ℃ |
蛋白酶抑制劑 | 230 μL | 460 μL | -20 ℃ |
RNase抑制劑 | 65 μL | 130 μL | -20 ℃ |
生物素RNA pull down試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
2、適用范圍廣:優(yōu)化的裂解液配方適用于動(dòng)物、植物、真菌等各類型細(xì)胞或組織樣本。
3、適配下游檢測(cè):競(jìng)爭(zhēng)洗脫效率高,蛋白無需變性,更有利于蛋白的質(zhì)譜檢測(cè);
4、技術(shù)應(yīng)用成熟、廣泛。
1. 擴(kuò)增帶有T7啟動(dòng)子的目標(biāo)序列,并以此為模板制備生物素標(biāo)記的RNA探針;
2. 鏈霉親和素磁珠與目標(biāo)RNA探針孵育;
3. 與待測(cè)蛋白液孵育,調(diào)取目標(biāo)RNA的結(jié)合蛋白。
RNA pull down預(yù)測(cè)結(jié)合蛋白的western-blot檢測(cè)圖
1. The HOXD9-mediated PAXIP1-AS1 regulates gastric cancer progression through PABPC1/PAK1 modulation. 2023. Cell Death & Disease. 1區(qū), IF=9.
2. He S.W. et al: AR-induced long non-coding RNA LINC01503 facilitates proliferation and metastasis via the SFPQ-FOSL1 axis in nasopharyngeal carcinoma. 2020. Oncogene. 1區(qū), IF=8.756.
3. He S.W. et al: LINC00173 facilitates tumor progression by stimulating RAB1B‐mediated PA2G4 and SDF4 secretion in nasopharyngeal carcinoma. 2023. Molecular Oncology. 2區(qū), IF=7.449.
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