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定量蛋白質(zhì)組學(xué)可分為相對(duì)定量和絕對(duì)定量。 相對(duì)定量是研究不同情況下蛋白質(zhì)組表達(dá)的差異,主要方法有穩(wěn)定同位素標(biāo)記和無(wú)標(biāo)記定量。 絕對(duì)定量是獲得蛋白質(zhì)的特定表達(dá)水平。 以下是相對(duì)定量蛋白質(zhì)組學(xué)常用的一些技術(shù):iTRAQ,SILAC,TMT等實(shí)驗(yàn)
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蛋白質(zhì)豐度對(duì)于免疫沉淀至關(guān)重要,在免疫沉淀 (IP) 過(guò)程中,感興趣的蛋白質(zhì) (POI) 被結(jié)合到珠子(如瓊脂糖或磁性瓊脂糖)上的特定抗體或納米抗體拉下。通過(guò)洗滌去除未結(jié)合的樣品內(nèi)容物,例如其他蛋白質(zhì)、細(xì)胞碎片和脂質(zhì),而沉淀的蛋白質(zhì)在珠子上富集。對(duì)于成功的 IP,POI 的豐度或表達(dá)水平至關(guān)重要,不幸的是,這經(jīng)常被遺忘。如果 POI 表達(dá)強(qiáng)烈且豐富,那么 IP 很可能是直截了當(dāng)?shù)?,沒(méi)有任何困難,但是,如果 POI 以低豐度或表達(dá)水平存在,則可能需要優(yōu)化 IP 協(xié)議。
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蛋白質(zhì)磷酸化是指由蛋白激酶催化,將ATP或GTP的γ位磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到底物蛋白的氨基酸殘基(絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸等)上的過(guò)程。蛋白質(zhì)磷酸化是體內(nèi)常見(jiàn)的調(diào)節(jié)方式,在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。 幾乎所有的蛋白質(zhì)在合成過(guò)程中或合成后都會(huì)發(fā)生某種形式的修飾。LC-MS/MS蛋白修飾位點(diǎn)鑒定單一蛋白或低復(fù)雜程度蛋白樣本的修飾鑒定,已知分子量的小分子藥物與蛋白結(jié)合的修飾位點(diǎn)鑒定,輝駿生物公司LC-MS/MS可以一次性鑒定成百上千種種蛋白質(zhì),準(zhǔn)確性和靈敏度高,價(jià)格實(shí)惠
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代謝組學(xué)主要通過(guò)研究代謝網(wǎng)絡(luò)中各種元素(如底物、產(chǎn)物、輔酶因子濃度、反應(yīng)速度等)的變化規(guī)律,確定影響生物體最終生物表型的分子組成和調(diào)控機(jī)制。憑借數(shù)十年的經(jīng)驗(yàn),輝駿生物致力提供可靠且具有成本效益的動(dòng)植物代謝組學(xué)服務(wù)。我們的解決方案包括廣泛靶向代謝組學(xué)服務(wù)、非靶向代謝組學(xué)服務(wù)、靶向代謝組學(xué)、脂質(zhì)組學(xué)服務(wù)?
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可以與特定蛋白質(zhì)或感興趣的生物分子結(jié)合的抗體稱(chēng)為一抗。以大鼠、小鼠、山羊和兔等動(dòng)物為宿主,以單克隆 (mAb)或多克隆抗體 (pAb)的形式生產(chǎn)一抗。二抗與直接附著于靶抗原的一抗結(jié)合。一抗的V區(qū)與抗原結(jié)合后,標(biāo)記的二抗將其V區(qū)連接到一抗的莖或C區(qū)。
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抗體也稱(chēng)為免疫球蛋白,是一種非常特異的分子,可與其靶抗原結(jié)合并在最常見(jiàn)的情況下中和它。他們通過(guò)促進(jìn)結(jié)構(gòu)的變化、阻斷完成功能所需的結(jié)合位點(diǎn)或標(biāo)記出它們與吞噬作用結(jié)合的細(xì)胞來(lái)實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)。它們還可以幫助抗原或細(xì)胞聚集??贵w分為 A、D、E、G 和 M 類(lèi),其中最常見(jiàn)的是 IgG。這種形式常見(jiàn)于血液和組織中,很容易穿過(guò)胎盤(pán)并為胎兒提供第一次免疫力。 IgG 類(lèi)有四個(gè)亞類(lèi),其結(jié)構(gòu)略有不同,但每個(gè)亞類(lèi)的“Y”臂末端都有兩個(gè)相同的抗原結(jié)合位點(diǎn)。
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原代神經(jīng)元培養(yǎng)物是研究細(xì)胞功能、蛋白質(zhì)相互作用和神經(jīng)毒性的有力工具,并有助于許多其他體外應(yīng)用。 培養(yǎng)神經(jīng)元的一些最大挫折可能是獲得低細(xì)胞產(chǎn)量和管理細(xì)胞死亡。優(yōu)化您的神經(jīng)元準(zhǔn)備工作流程也可能既費(fèi)時(shí)又費(fèi)錢(qián)。輝駿生物蛋白質(zhì)技術(shù)人員在下文提供七個(gè)技巧,或許能幫助提高您的初級(jí)神經(jīng)元培養(yǎng)物的完整性。
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生物標(biāo)志物是可以標(biāo)記系統(tǒng)、器官、組織、細(xì)胞和亞細(xì)胞的結(jié)構(gòu)或功能發(fā)生變化或可能發(fā)生變化的生化指標(biāo),如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、酶、脂類(lèi)、聚糖、代謝物等。用作研究的生物標(biāo)志物。篩選生物標(biāo)志物的常用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù):質(zhì)譜(MS)、 蛋白質(zhì)微陣列、串聯(lián)質(zhì)譜(TOF-TOF)
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在典型的染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)?反應(yīng)中,目標(biāo)蛋白和 DNA 的交聯(lián)是通過(guò)向生長(zhǎng)的細(xì)胞中添加甲醛來(lái)進(jìn)行的,染色質(zhì)的制備、超聲剪切和預(yù)清除以減少非特異性免疫沉淀。使用特異性抗體進(jìn)行免疫沉淀。從蛋白質(zhì)A或蛋白質(zhì)G瓊脂糖樹(shù)脂中洗脫蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物后,加熱樣品以逆轉(zhuǎn)共價(jià)交聯(lián)。DNA片段通過(guò)PCR或?qū)崟r(shí)PCR進(jìn)行純化和分析。輝駿生物使用ChIP-qPCR、ChIP-seq等技術(shù)在染色質(zhì)免疫共沉淀ChIP研究實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)超10年,公司在DNA與蛋白相互作用研究方面經(jīng)驗(yàn)豐富,自有實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地,ChIP外包代作服務(wù)價(jià)格優(yōu)惠,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)已協(xié)助發(fā)表上千位客戶(hù)發(fā)表高分論文
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Co-IP 是一種有用且相對(duì)簡(jiǎn)單的工具,可用于識(shí)別蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用。輝駿生物在本文將為您的Co-IP實(shí)驗(yàn)做好準(zhǔn)備,提供一個(gè)方便的 CoIP 協(xié)議并討論您應(yīng)該包含的coip控件。輝駿專(zhuān)注免疫共沉淀CoIP、Co-IP WB、Co-IP MS實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)近10年,專(zhuān)業(yè)的蛋白質(zhì)互作技術(shù)平臺(tái)和質(zhì)譜平臺(tái),全過(guò)程把控Co-IP實(shí)驗(yàn)詳細(xì)步驟和產(chǎn)物的鑒定,高分文章案例多。
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iTRAQ/TMT通過(guò)不同分子量的實(shí)際對(duì)不同來(lái)源樣品進(jìn)行標(biāo)記的方式,實(shí)現(xiàn)不同樣品間蛋白質(zhì)組比較的目標(biāo),兩種方法都一次性完成(iTRAQ 8個(gè)/TMT 16個(gè))全部樣品的定性定量分析,降低了實(shí)驗(yàn)誤差,排除儀器造成的樣本間差異,穩(wěn)定性更高,操作簡(jiǎn)單,數(shù)據(jù)分析流程簡(jiǎn)單,適用于所有物種蛋白的定量分析。
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染色質(zhì)的修飾對(duì)于調(diào)節(jié)幾乎所有以DNA為模板的生物過(guò)程至關(guān)重要,單細(xì)胞染色質(zhì)修飾譜可用于評(píng)估染色質(zhì)修飾,這可以提供表觀遺傳變化和生理變化之間的關(guān)系。 輝駿生物使用ChIP-qPCR、ChIP-seq等技術(shù)在染色質(zhì)免疫共沉淀ChIP研究實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)超10年,公司在DNA與蛋白相互作用研究方面經(jīng)驗(yàn)豐富自有實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地ChIP外包代作服務(wù)價(jià)格優(yōu)惠,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)已協(xié)助發(fā)表眾多高分論文!