單克隆抗體 (MAb) 由單個(gè) B 細(xì)胞克隆產(chǎn)生，可與單一類型的抗原結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合。  MAb 是同質(zhì)抗體，不能與單體蛋白形成晶格，因?yàn)樗鼈冎荒芘c抗原上的單個(gè)表位結(jié)合。  開(kāi)發(fā)于 1970 年代的 MAb 可以針對(duì)任何給定物質(zhì)生產(chǎn)，因此，它們可用于檢測(cè)和純化任何感興趣的物質(zhì)。  這使得 MAb 成為分子生物學(xué)、生物化學(xué)和醫(yī)學(xué)的強(qiáng)大工具。

單克隆抗體的生產(chǎn)

MAb 是使用雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)的。  這種方法提供了無(wú)限的均質(zhì)抗體供應(yīng)，具有所需的特異性。

雜交瘤技術(shù)

雜交瘤技術(shù)是由 Georges K?hler 和 César Milstein 于 1975 年開(kāi)發(fā)的，他們?cè)?1984 年分享了諾貝爾生理學(xué)/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。他們的方法利用了骨髓瘤細(xì)胞不斷分裂和生長(zhǎng)并產(chǎn)生抗體的能力。

在這種方法中，來(lái)自免疫哺乳動(dòng)物的 B 淋巴細(xì)胞與永生的骨髓瘤細(xì)胞融合。  融合產(chǎn)物被克隆形成雜交瘤并無(wú)限增殖。  使用 ELISA 分析雜交瘤以選擇可用于在第二只動(dòng)物中誘導(dǎo)腫瘤的所需均質(zhì)免疫球蛋白混合物。

腫瘤會(huì)分泌一種富含抗體的液體，稱為腹水，將其提取并進(jìn)行色譜分離以分離 MAb。  然后將這些 MAb 純化以去除污染物，然后在實(shí)驗(yàn)室中用于不同目的。  由于雜交瘤是永生的，因此該技術(shù)提供了可再生的 MAb 來(lái)源。

單克隆抗體的應(yīng)用

MAb 的單一特異性可用于以下領(lǐng)域：

1、研究

● 分子構(gòu)象變化研究

● 磷酸化狀態(tài)分析

● 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究

● 在結(jié)構(gòu)分析中，例如 X 射線晶體學(xué)

● 識(shí)別蛋白質(zhì)家族的單個(gè)成員

2、藥品

● 在癌癥診斷和治療中

● 用于預(yù)防同種異體移植排斥

● 在腫瘤和造血疾病治療中

● 治療心肌梗塞

● 逆轉(zhuǎn)藥物毒性

因?yàn)閱慰寺】贵w分子在藥物研發(fā)、診斷試劑開(kāi)發(fā)中扮演了關(guān)鍵的角色。抗體分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)，特別是其CDR區(qū)域的氨基酸序列是發(fā)揮其生物學(xué)功能的核心，對(duì)其完整序列準(zhǔn)確快速的分析具有重要的意義。輝駿生物基于高精度、高分辨率質(zhì)譜設(shè)備，結(jié)合自主研發(fā)的測(cè)序技術(shù)平臺(tái)，能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)抗體氨基酸序列的精準(zhǔn)解讀。同時(shí)，我們有自建的高通量表達(dá)驗(yàn)證平臺(tái)，能夠?qū)σ褱y(cè)得的抗體序列進(jìn)行高通量表達(dá)驗(yàn)證，從而保證交付抗體的活性。

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單克隆抗體的優(yōu)勢(shì)

MAb 的主要優(yōu)勢(shì)如下：

● MAb 是同質(zhì)且一致的。

● 一旦開(kāi)發(fā)出合適的雜交瘤，它們就可以可再生地產(chǎn)生。

● 與多克隆抗體相比，MAb 中特定抗體的純度和濃度更高。

● MAb 對(duì)鹽濃度和 pH 值的微小變化高度敏感。

● 它們可以很容易地測(cè)試交叉反應(yīng)性

單克隆抗體的缺點(diǎn)

MAb 的一些缺點(diǎn)如下：

● MAb 的單一特異性也限制了它們的應(yīng)用

● 抗原表位結(jié)構(gòu)的微小變化會(huì)影響 MAb 的功能

● MAb 的產(chǎn)生應(yīng)該對(duì)其需要結(jié)合的抗原非常特異。

● 它們不適合用于涉及抗原交聯(lián)的血凝等分析；  輕微的修飾會(huì)影響抗體的結(jié)合位點(diǎn)

● 雖然這些限制可以通過(guò)匯集多個(gè)具有所需特異性的 MAb 來(lái)克服，但此類 MAb 的鑒定可能證明是昂貴、費(fèi)力和耗時(shí)的。

概括

多年來(lái)，抗體一直是實(shí)驗(yàn)室研究中的非凡工具。 MAb 是在大約 25 年前開(kāi)發(fā)的，并且已將抗體的范圍擴(kuò)大到對(duì) 離體 多種疾病 科學(xué)家們通過(guò)將它們用于免疫療法，越來(lái)越多地利用它們的高特異性和選擇性結(jié)合能力。

雜交瘤技術(shù)的出現(xiàn)導(dǎo)致MAb的無(wú)限可用性。 使用該技術(shù)生成的大量 MAb 有助于識(shí)別和分析抗原來(lái)自幾種不同人類黑色素瘤、癌、淋巴瘤和白血病迄今為止可用的文獻(xiàn)報(bào)道了超過(guò)100 種針對(duì)人類癌癥的獨(dú)特MAb。