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中文標(biāo)題：ATF1蛋白的Thr184磷酸化促進(jìn)胃癌轉(zhuǎn)移和調(diào)控MMP2表達(dá)

發(fā)表期刊：Journal of Translational Medicine

中科院分區(qū)：2區(qū)

影響因子：8.440

發(fā)表時間：2022年4月

合作單位：廣東醫(yī)科大學(xué)

運用技術(shù)：免疫共沉淀CO-IP、LC-MS/MS蛋白質(zhì)譜鑒定（由輝駿生物提供技術(shù)支持，點擊查看服務(wù)詳情）

● 研究背景

激活轉(zhuǎn)錄因子1（ATF1）是一種ATF/CREB家族的轉(zhuǎn)錄因子。ATF1和CREB通過家族內(nèi)的同源或異二聚化或與其他b-zip轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄。之前的研究已發(fā)現(xiàn)Thr184是ATF1的一個新磷酸化位點，然而，Thr184磷酸化（p-ATF1-T184）在腫瘤中的作用尚不清楚。本研究探討了p-ATF1-T184在胃癌(GC)轉(zhuǎn)移和基質(zhì)金屬肽酶2（MMP2）調(diào)控中的作用。

● 研究方法

采用免疫組化方法分析p-ATF1-T184水平及其與臨床病理特征的關(guān)系。采用細(xì)胞劃痕、Transwell實驗觀察p-ATF1-T184在胃癌侵襲、轉(zhuǎn)移中的作用。通過qRT-PCR、western blot、明膠酶譜法、染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)、熒光素酶報告基因?qū)嶒灪铜h(huán)己亞胺實驗等研究p-ATF1-T184對MMP2的調(diào)控作用。利用腫瘤基因組圖譜(Cancer Genome Atlas, TCGA)數(shù)據(jù)分析ATF1和MMP2在胃癌中的表達(dá)及其預(yù)后作用。采用免疫共沉淀法(co-IP)結(jié)合質(zhì)譜分析(MS)，以鑒定可能磷酸化ATF1蛋白Thr184位點的上游激酶。

● 研究結(jié)果

在126例胃癌患者中發(fā)現(xiàn)高水平的p-ATF1-T184與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和低生存率顯著相關(guān)。P-ATF1-T184促進(jìn)胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲。ATF1-T184磷酸化可調(diào)節(jié)MMP2 mRNA、蛋白表達(dá)及胞外活性。

P-ATF1-T184進(jìn)一步提高了ATF1的DNA結(jié)合能力和轉(zhuǎn)錄活性，穩(wěn)定了ATF1的蛋白表達(dá)。此外，TCGA數(shù)據(jù)和IHC結(jié)果提示ATF1和MMP2 mRNA水平以及p-ATF1-T184和MMP2蛋白水平可作為胃癌的預(yù)后指標(biāo)。兩個蛋白激酶相關(guān)基因LRBA和S100A8與ATF1在GC中的表達(dá)相關(guān)。

● 研究結(jié)論

p-ATF1-T184通過調(diào)節(jié)MMP2促進(jìn)胃癌轉(zhuǎn)移。

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