根據(jù)輝駿生物10多年對 ChIP 實驗的研究,以下原因可能會導(dǎo)致 ChIP-seq 的假陽性率高:
DNA 片段化方法、染色質(zhì)開放性的異質(zhì)性、PCR 擴增偏差、基因組重復(fù)以及測序和序列比對中的錯誤會導(dǎo)致假陽性,測序后,將序列與已知基因組進行比較并確定真正的結(jié)合位點(峰)。對于轉(zhuǎn)錄因子,尋找對應(yīng)“峰”的下游調(diào)控基因(靶基因)或構(gòu)建轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點的保守結(jié)合序列。 如果轉(zhuǎn)錄因子的基序已知,計算基序序列在“峰”序列中的百分比,即可估計實驗結(jié)果的可靠性。
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