IRB 科學(xué)家確定基因組上基因編輯可能導(dǎo)致不良反應(yīng)的關(guān)鍵點(diǎn)

發(fā)布時(shí)間：2022-08-18 09:58:07作者：輝駿生物-fitgene

CRISPR/Cas9 是一種常用的、非常精確的基因編輯技術(shù)，由 Jennifer A. Doudna 和 Emmanuelle Charpentier 開發(fā)，獲得了 2020 年諾貝爾化學(xué)獎。 CRISPR 通常被稱為“基因剪刀”，它允許將所需的 DNA 序列引入（實(shí)際上）基因組的任何位置，從而修飾或滅活基因。這項(xiàng)技術(shù)廣泛用于生物醫(yī)學(xué)研究，一些基于 CRISPR 的療法正在臨床試驗(yàn)中用于治療人類血液疾病、某些類型的癌癥和 HIV 等疾病。

由 ICREA 研究員 Fran Supek 博士領(lǐng)導(dǎo)的 IRB Barcelona 的科學(xué)家們現(xiàn)在報(bào)告說，根據(jù)人類基因組的目標(biāo)位點(diǎn)，CRISPR 基因編輯會導(dǎo)致細(xì)胞毒性和基因組不穩(wěn)定性。這種不需要的影響是由關(guān)鍵腫瘤抑制蛋白 p53 介導(dǎo)的，并且由編輯點(diǎn)附近的 DNA 序列和周圍區(qū)域的各種表觀遺傳因素決定。

使用計(jì)算方法，基因組數(shù)據(jù)科學(xué)實(shí)驗(yàn)室的研究人員分析了為人類細(xì)胞設(shè)計(jì)的最流行的 CRISPR 文庫，并檢測到了 3,300 個(gè)顯示出強(qiáng)烈毒性作用的目標(biāo)點(diǎn)。大約 15% 的人類基因包含至少一個(gè)有毒的編輯點(diǎn)。

可以在多個(gè)位置編輯特定基因。首席研究員 Miguel-Martin álvarez 博士說：“對于調(diào)控重要或具有某些表觀遺傳標(biāo)記的基因區(qū)域是最有可能觸發(fā) p53 反應(yīng)的區(qū)域，因此應(yīng)作為一般建議避免使用?！?br/>

p53 介導(dǎo)的毒性和腫瘤發(fā)生

p53是一種被稱為基因組守護(hù)者的蛋白質(zhì)。它檢測 DNA 損傷并導(dǎo)致細(xì)胞停止分裂并可能導(dǎo)致程序性死亡，從而阻止它們復(fù)制和擴(kuò)大其 DNA 中的“錯(cuò)誤”。因此，p53 是針對癌癥和其他 DNA 損傷相關(guān)并發(fā)癥的天然保護(hù)機(jī)制的基礎(chǔ)。

CRISPR 基因編輯通常需要切割兩條 DNA 鏈。在某些情況下，這種操作可以觸發(fā) p53 反應(yīng)，其中編輯的細(xì)胞可以被“標(biāo)記”為受損然后被消除，從而降低基因編輯過程的效率。

然而，關(guān)于 p53 和基因編輯的主要并發(fā)癥是，克服 CRISPR 編輯的細(xì)胞可能正是因?yàn)?p53 功能缺陷而這樣做。也就是說，這些細(xì)胞可能不太能夠檢測 DNA 損傷和/或標(biāo)記細(xì)胞以進(jìn)行程序性死亡。結(jié)果，基因編輯程序最終可能有利于具有不穩(wěn)定基因組的細(xì)胞群，這意味著它們?nèi)菀追e累進(jìn)一步的突變，從而增加患惡性腫瘤的風(fēng)險(xiǎn)。

“這種不良后果可能會導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定的風(fēng)險(xiǎn)，這在體外 CRISPR 療法的背景下是非常不受歡迎的，其中來自患者的細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)室中被編輯并重新引入患者體內(nèi)。我們希望我們的研究提供一些指導(dǎo)如何設(shè)計(jì)更安全的 CRISPR 試劑，并鼓勵對這個(gè)問題進(jìn)行進(jìn)一步研究，”Supek 博士總結(jié)道。

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